Diafonizácia
Diafonizácia (alebo čistenie a farbenie) je laboratórna technika používaná na zvieracích vzorkách, ktorá využíva rôzne chemikálie na spriehľadnenie mäkkých tkanív. Telo zvieraťa sa kúpe v trypsíne (enzým, ktorý rozkladá mäso), čím sa tkanivá stanú priesvitnými. Následne sa kosti a chrupavky zafarbia špeciálnymi farbivami, najčastejšie alizarínovou červenou (pre kosti) a alciánovou modrou (pre chrupavky).[1]
Význam
[upraviť | upraviť zdroj]Táto metóda je najefektívnejšia pri malých živočíšnych exemplároch, kde je zabezpečený rovnomerný prienik chemikálií do tkanív. Vzorky, ktoré nie je možné pitvať, sa pomocou Diafonizácie uchovávajú ako mokré preparáty (priehľadné telo so zafarbenými vnútornými štruktúrami). Používa sa najmä na spracovanie krehkých alebo veľmi chúlostivých druhov, ktoré by sa pri tradičnej pitve poškodili. Umožňuje študovať anatómiu zvieraťa bez potreby narušenia jeho tela, čo z nej robí neinvazívnu dokumentačnú techniku.
Pri väčších organizmoch býva účinnosť nižšia, pretože trypsín nedokáže preniknúť dostatočne hlboko do tkaniva. Metóda je menej účinná pri väčších exemplároch, keďže enzým trypsín má obmedzenú schopnosť prenikať hlboko do tkanív.
História
[upraviť | upraviť zdroj]Diafonizáciu prvýkrát vyvinul O. Schultze v roku 1897. Neskôr ju mnoho vedcov upravilo ako napr. Mall (1906), Dawson (1926), Lipman (1935), Cumley (1939), True (1947), Dingerkus (1977) a Potthoff (1984).[2][3][4][5]
Spôsob
[upraviť | upraviť zdroj]- Začína sa prečisťovaním zvieraťa pomocou transparentného kúpeľa s trypsínom a tráviacim enzýmom, ktorý pomaly rozkladá mäso.
- Po jeho vyčistení sa vzorka vloží do glycerínu.
- Farby, ktoré sa používajú najčastejšie na sfarbenie kostí a chrupaviek, sú alizarínová červená a alciánová modrá.[6]
- Diafonizácia nie je vhodná pre zvieratá dlhšie ako 30 centimetrov, z dôvodu obmedzenej schopnosti trypsínového kúpeľa prenikať do tkanív väčších zvierat (výnimkou sú hady).[1]
Doplňujúce informácie
[upraviť | upraviť zdroj]Mnoho ľudí považuje Diafonizáciu za vizuálne pozoruhodný a prekrásny spôsob zachovať telo zvieraťa. Pokrok v technológii zobrazovania spôsobil, že táto prax je takmer zastaraná, hoci sa rozširuje ako forma umenia.
Aj keď sa tieto exempláre môžu zdať predražené, náklady často odrážajú značný čas a starostlivosť, ktorú si ich výroba vyžaduje. Použité chemikálie môžu byť dosť drahé, čo môže byť odrádzajúce so začatím Diafonizácie. Napriek svojim zásluhám sa Diafonizácia vo vedeckej oblasti veľmi nepoužíva.[7]
Zdroje
[upraviť | upraviť zdroj]Tento článok je čiastočný alebo úplný preklad článku Diaphonization na anglickej Wikipédii.
- ↑ a b OOMMEN, Ansel. Dyeing the Dead: The Artful Science of Diaphonization [online]. Atlas Obscura, 2014-05-14, [cit. 2025-04-21]. Dostupné online. (po anglicky)
- ↑ https://www.researchgate.net/publication/320357754_Elaboration_of_transparent_biological_specimens_for_visualisation_of_developing_cartilage_and_bone
- ↑ DINGERKUS, Guido; AND UHLER, Lowell D.. Enzyme Clearing of Alcian Blue Stained Whole Small Vertebrates for Demonstration of Cartilage. Stain Technology, 1977-01-01, roč. 52, čís. 4, s. 229–232. PMID: 71769. Dostupné online [cit. 2025-04-21]. ISSN 0038-9153. DOI: 10.3109/10520297709116780.
- ↑ DWYER, Joseph; RAMIREZ, M. Desmond; KATZ, Paul S.. Accelerated clearing and molecular labeling of biological tissues using magnetohydrodynamic force. Scientific Reports, 2021-08-12, roč. 11, čís. 1, s. 16462. PMID: 34385489 PMCID: PMC8360944. Dostupné online [cit. 2025-04-21]. ISSN 2045-2322. DOI: 10.1038/s41598-021-95692-2.
- ↑ https://kb.osu.edu/server/api/core/bitstreams/4750e45f-a200-5801-89b4-8901e6e44aaf/content
- ↑ CONNECTED, Science. The Artful Science of Diaphonization [online]. 2015-07-20, [cit. 2025-04-21]. Dostupné online. (po anglicky)
- ↑ CHITRA, V.; S, Evelyn Sharon. Diaphonization of the Ovariectomized Laboratory Animal. Research Journal of Pharmacy and Technology, 2020-05-30, roč. 13, čís. 5, s. 2228–2232. Dostupné online [cit. 2025-04-21]. DOI: 10.5958/0974-360X.2020.00400.X. (English)