Prietoková cytometria

Prietoková cytometria je vedecká metóda používaná k detekcii a meraniu fyzikálnych a chemických vlastností populácie buniek alebo iných častíc.^[1]

Tento proces spočíva vo vložení vzorky – suspenzie buniek alebo častíc do cytometra, kde vzorka veľmi úzkym a rýchlym prietokom preteká cez laserový lúč (bunky alebo častice prechádzajú laserom jedna po druhej). Rozptýlené svetlo určuje charakteristiky buniek a ich komponentov. Bunky bývajú často označené fluorescenčnými značkami, čo spôsobí, že svetlo je absorbované a emitované v rozličných vlnových dĺžkach. Vďaka prietokovej cytometrii môžu byť v krátkom čase zmerané tisíce buniek a zozbierané dáta sú následne analyzované v počítači pomocou rôznych softvérov.

Prietoková cytometria je často využívaná vo výskume, klinických štúdiách a v klinickej praxi. Možné využitia prietokovej cytometrie zahŕňajú:

počítanie buniek
triedenie buniek
stanovovanie vlastností a funkcie buniek
detekcia mikroorganizmov
detekcia povrchových znakov buniek
diagnóza chorôb, napr. leukémií

Prietokový cytometer je prístroj poskytujúci kvantifikovateľné dáta zo vzorky. Existujú však aj iné prístroje využívajúce prietokovú cytometriu ako napríklad prietokové triediče („cell sorters“).

Využitie

Prietoková cytometria umožňuje simultánnu analýzu viacerých parametrov buniek pomocou zdrojov svetla s rôznymi vlnovými dĺžkami a filtrov pre detekciu fluorescencie. Elektronická selekcia subpopulácií pri analýze získaných dát („gating“) tieto parametre integruje. Zvolené bunky sa vyberú označením zóny grafu (dot plotu), v ktorej sa daná populácia nachádza – populácia sa vyberie na základe prítomnosti alebo neprítomnosti pozorovaných parametrov. Následne môže byť populácia hodnotená a rozdelená v ďalšom dot plote pomocou iných fluorescenčných parametrov.^[2]

Metóda je využívaná vo veľa oblastiach, nielen vedeckých, ale aj klinických. Vo vede sa prietoková cytometria aplikuje napr. v imunológii, molekulárnej biológii, virológii, rastlinnej biológii. V medicíne zas v diagnostike nádorov, pri prenatálnej diagnostike, pri transplantáciách alebo v hematológii.

Fenotypizácia bunkových populácií

V klinických laboratóriách je cytometria používaná k stanoveniu profilu leukocytov v krvi pacienta.

Referencie

↑ PICOT, Julien; GUERIN, Coralie L.; LE VAN KIM, Caroline. Flow cytometry: retrospective, fundamentals and recent instrumentation. Cytotechnology, 2012, roč. 64, čís. 2, s. 109–130. ISSN 0920-9069. DOI: 10.1007/s10616-011-9415-0. (po anglicky)
↑ BAJGELMAN, Marcio Chaim. Data Processing Handbook for Complex Biological Data Sources. London : Elsevier, 2019. ISBN 978-0-12-816548-5. DOI:10.1016/b978-0-12-816548-5.00008-3 S. 119–124. (po anglicky)

Iné projekty

Commons ponúka multimediálne súbory na tému Prietoková cytometria

Externé odkazy

Fluorophores.org – Datenbank für Fluoreszenzfarbstoffe Archivované 2012-12-05 na Archive.today

[1] PICOT, Julien; GUERIN, Coralie L.; LE VAN KIM, Caroline. Flow cytometry: retrospective, fundamentals and recent instrumentation. Cytotechnology, 2012, roč. 64, čís. 2, s. 109–130. ISSN 0920-9069. DOI: 10.1007/s10616-011-9415-0. (po anglicky)

[2] BAJGELMAN, Marcio Chaim. Data Processing Handbook for Complex Biological Data Sources. London : Elsevier, 2019. ISBN 978-0-12-816548-5. DOI:10.1016/b978-0-12-816548-5.00008-3 S. 119–124. (po anglicky)

[1]

[2]